Biomedicina

Thursday, 06 de April de 2006

Reglas de oro contra las arrugas

Reglas de oro contra las arrugas

Si aún no han aparecido, puedes retrasar su llegada, pero si ya tienes algunas, podrás atenuarlas

Reglas de oro contra las arrugas

Si aún no han aparecido, puedes retrasar su llegada, pero si ya tienes algunas, podrás atenuarlas

Mas en: http://www.eluniversal.com.mx/articulos/30221.html

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Saturday, 18 de February de 2006

Determinacion de la glucosilacion de los tejidos.

Determinacion de la glucosilacion de los tejidos (ensayo de borohidrido-Periodato).

1). 100 µL (por triplicado) de homogeneizado tisular.

2). Para el testigo se utilizan 20 µL de NaOH 0.01 mM NaOH como testigo (triplicados) y 80 uL de agua BD.

3). 20 µL de sodium borohydride 0.2 M disuelto en NaOH 0.01 mM helado. (Sodium tetrahydroborate, NaBH4, J.T. Baker: V023)

4). Incubar a 22 ºC durante 1 h.

5). 20 µL de HCl 0.2 M.

6). 20 µL periodato de sodio 0.1 M.

7). Incubar a 22 ºC durante 30 min.

8). Incubar a 4 ºC (agua con hielo) durante 10 min. (para deterner la reaccion)

9). 40 µL de NaOH 0.7 M helado.

10). 40 µL de sulfato de zinc 15%.

11). Cenrifugar a 13000 rpm durante 10 min

12). Recuperar el sobrenadante

13). Centifugar 13000 rpm durante 10 min

14). Recuperar 200 µL de sobranadante

15). 100 µL reactivo de coloracion (92 µL acetilacetona + 10 mL de acetato de amonio 6.6 M).

16). Incubar a 37 ºC durante 1 h.

17). Centrifugar a 15000 rp durante 10 min.

18). Transferir 270 µL del sobrenadante a una microplaca de 96-pozos

19). Leer la absorbancia a 405 nm en un lector de microplacas

Curva de calibracion

Solucion de fructuosa (0-40 nmol).

Se tiliza el buffer de disulucion (100 µL) tanta al blaco como a los estanadres de calibracion.

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Thursday, 19 de January de 2006

LINEAS DE INVESTIGACIÓN

El área de investigación en la que me encuentro principalmente involucrado es la fisiopatología y fármaco-toxicología renal, abajo enumero algunas de las líneas de trabajo.

Si desea mayor información escriba a labtox01@yahoo.com o visite nuestros ostros sitios: http://labtox.blogspot.com ahi encontrara mas informacion acerca de nuestras actividades, protocolos de laboratorio y presentaciones en congresos.

En esta bitacora encontrará algunos de los resúmenes de los trabajos que hemos presentado en diversos foros.

Lineas de investigacion

- Medicina nefrologica basica y clinica

- Mudulación de la permeabilidad epitelial inducida por factores urinarios.

- Estudio del mecanismo de acción del daño renal inducido por drogas varias

- Análisis y purificación de proteínas urinarias por diferentes metodologías

- Determinación de la concentración de proteínas urinarias de sujetos sanos y enfermos

- Cambios en la permeabilidad intestinal producidos por fármacos y tóxicos.

- Efecto de la ciclosporina en combinación con otros medicamentos sobre la función renal y hemodinámica de la rata.

- Efecto de la alfa-asarona y un análogo sobre la función renal y hemodinámica de la rata.

- Cambios en la expresión de marcadores de estrés oxidativo durante los procesos morbosos renales.

- Efecto de plantas con potencialidad farmacológica (o tóxica) en la función renal y gastrointestinal de la rata.

- Modulación de la permeabilidad epitelia renal e intestinal de la rata

- Diagnóstico del daño renal inducido por fármacos, depuración de iones, agua y sustancias por vía renal.

- Efecto de los contaminantes sobre el desarrolllo radicular de semillas.

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Thursday, 19 de January de 2006

2005 - XIV JORNADA DE INVESTIGACIÓN EN SALUD DEL ESTADO DE PUEBLA Resumen 236

CARACTERÍSncAS DE LA SALIVA DE PACIENTES DIABÉTICOS

Juan M. Gallardo a, Gisela Quintanar Salcedo b, Catalina Flores-Maldonado c, Rosa Ma. Estrada Domínguez b, Agustín
Ruiz-Cabrera d y Jessica V. Cuellar b.

a Unidad de Investigación Medica en Enfermedades Nefrológicas, Hospital de Especialidades, Centro Médico Nacional Siglo "XXI", IMSS, México, D.F.,
b Facultad de Estomatología, BUAP., Puebla, Pue.,
c Departamento de Fisiología, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN., México, D.F., y
d Laboratorio de Investigación Medica, Facultad Estudios Superiores-Iztacala, UNAM. Los Reyes, Iztacala, Mex.
Correo-e: gallardo@salud.gob.mx

OBJETIVO: Determinar las características fisicoquímicas y bioquímicas de la saliva de un grupo de pacientes diabéticos y compararlas contra el grupo testigo.

PROCEDIMIENTOS: Se reclutaron a pacientes con diabetes mellitus tipo 11 y pacientes aparentemente sanos, pero con los mismos factores de riesgo de los pacientes diabéticos. Se midieron el flujo salival, concentración de proteínas, glucosa, carbohidratos totales, y óxido nítrico en la saliva no estimulada y estimulada.

RESULTADOS: Los pacientes diabéticos presentaron disminución el pH salival, disminución en el flujo salival, exceso de espuma salival, incremento en la concentración de glucosa, carbohidrato s totales, proteínas totales y óxido nítrico comparados con los testigos.

CONCLUSIÓN: Este trabajo demuestra que la DM modifica de manera sustancial las características flSicoquímicos como bioquímicas de la saliva. Estos cambios pudieran ser los responsables de algunas de las alteraciones orales que se presentan en el paciente con DM. Así mismo proponemos que la determinación de glucosa y de los carbohidratos totales en saliva pueden ser de utilidad en el diagnostico y control de la enfermedad.

Agradecimientos: Este trabajo fue parcialmente fmanciado por Fondo para el Fomento de la Investigación Médica (FOFOI) del Instituto Mexicano del Seguro Social. No. 2003-088 otorgado a JMG.

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Thursday, 19 de January de 2006

2005 - XIV JORNADA DE INVESTIGACIÓN EN SALUD DEL ESTADO DE PUEBLA. Resumen 235

ESTRES OXIDATIVO EN FUMADORES CRÓNICOS

Juan M. Gallardo (a), Elia Patricia Juárez-Razo (b,c), Catalina E. Flores-Maldonado (d), Gisela Quintanar Salcedo (c).

a Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Nefrológicas. Centro Médico Nacional "Siglo XXI" del IMSS. México, D.F.
b Servicio de Odontología, UMF-12, Cholula, Pue.,
c Facultad de Estomatología, Benemérita Universidad Autónoma
de Puebla, Puebla, Pue.
d Departamento de Fisiología, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN., México, D.F. Correo-e:gallardo@salud.gob.mx

OBJETIVO: Estudiar en impacto del tabaquismo en las concentraciones plasmáticas del oxido nítrico, un agente vasodilatador y radical libre así como en el malondialdehído, un producto de la lipoperoxidación lipídica, en los sujetos expuestos a la inhalación del humo del tabaco.

PROCEDIMIENTO: Estudio transversal, comparativo, no pareado, en población abierta, estudiados de septiembre a noviembre de 2004. Se seleccionaron a sujetos no fumadores (grupo testigo) y sujetos fumadores (grupo expuesto), ambos grupos comparables en edad, sexo y características sociodemográficas. Se obtuvieron muestras salivales donde se le determinó las concentraciones de óxido nítrico y malondialdehído.

RESULTADOS: Existe un incremento significativo del ON y del MDA salival en los sujetos fumadores vs. los sujetos nofumadores (P ≤ 0,001).

CONCLUSIONES: Los niveles elevados de MDA plasmáticos están muy relacionados a la exposición de humo de tabaco, estos resultados apoyan la teoría de que el consumo de tabaco es causa de estrés oxidativo. Los resultados de este trabajo justifican que se continué en el futuro evaluando la presencia de estos mismos marcadores estudiados en sujetos con antecedentes de tabaquismo crónico y que actualmente han abandonado ese mal hábito.

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Thursday, 19 de January de 2006

2005 - XIV JORNADA DE INVESTIGACIÓN EN SALUD DEL ESTADO DE PUEBLA Resumen 234

PEROXIDACION LIPIDICA EN ESPEMATOZOIDES DE SUJETOS APARENTEMENTE SANOS

Juan M: Gallardo (a), y José A. Sanchez-Galindo (b)
a Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Nefrológicas,
Hospital de Especialidades, Centro Médico Nacional "Siglo XX!", IMSS, México, D.F.,
b Servicio de Urología, Hospital de Especialidades, Centro Médico Nacional "MAC", Puebla, Pue. Correo-e: gallardo@salud.gob.rnx

OBJETIVO: Determinar la concentración de MDA en los esperrnatozoides de un grupo de hombres aparentemente sanos.

PROCEDIMIENTOS: Participaran voluntariamente 20 sujetos aparentemente sanos (amplitud 18-45 años, 26.7:i: 7.3) a quienes después de eyacular se obtuvo el líquido seminal mediante centrifugación refrigerada a 2000 rpm. La muestras fueron analizadas dentro de las primeras 48 h de obtenidas. Para la reacción del TBA, 20 x 106 esperrnatozoides humanos se incubaron con sulfato ferroso 0,2 rnM Y ascorbato de sodio 1 rnM. Luego de 1 h de incubación a 37°C, la suspensión celular se desproteinizó con ácido tricloroacético al 20%. El sobrenadante se incubó a 90 °C por 10 min, posteriormente se adicionó ácido tiobarbiturico al 2%. La reacción colorida se determino espectrofotométricamente.

RESULTADOS: Al analizar los resultados obtenidos se encontró que los valores obtenidos no siguen una distribución normal.

MDA (ng/ngL)

N .......... X ......... D.E ........ Moda ......... Mediana
20 ........ 778.3 .... 387........ 603.4 .......... 711.5

CONCLUSIÓN: La importancia de este trabajo radica en que actualmente se hace necesario conocer en que grado la lipoperoxidación pudiera afectar a los individuos con antecedentes de infertilidad masculina, y para ello es necesario conocer cuales son los valores "normales" clínicos de este marcadote de estrés oxidativo, que aun no ha sido reportado en la literatura médica. Este estudio proporciona datos preliminares de los valores que pueden encontrarse en una población aparentemente normal.

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Thursday, 19 de January de 2006

2005 - XIV JORNADA DE INVESTIGACIÓN EN SALUD DEL ESTADO DE PUEBLA Resumen No. 232

MEDIADORES DE OXIDACIÓN EN LIQUIDO SINOVIAL. Estudio comparativo en 3 padecimientos vs sujetos sanos.
Gallardo-Montoya JM, Ramírez-Palrna MM, Bañuelos-Ramírez D, Sánchez-Alonso S.
Hospital de especialidades CMN MAC "Gral. Manuel Á vila Camacho" UMAE y UMF 01 IMSS. Puebla, Pue., y Unidad de Investigación Biomédica. CMN S XXI. México, D.F. .

Se ha considerado al oxido nítrico (ON), el superoxido e intermediarios como L-citrulina y otras moléculas como importantes mediadores deletéreos en diversos padecimientos y son parte importante de la cascada de muerte celular. Sus concentraciones en líquido sinovial normal y en algunos padecimientos no se han estudiado suficientemente.

Objetivo: determinar y contrastar las concentraciones de ON, superoxido y otros agentes en 3 grupos de padecimientos y contrastarlos con sujetos voluntarios sanos.

Metodología: Mediante técnica habitual de punción en rodillas se obtuvo líquido sinovial en pacientes con OA, AR, ARe activa y voluntarios sanos. Cada grupo con n=10. La muestra se congeló y se procesó mediante técnicas de L-Name y PCR, además de citoquímico y cultivos para gérmenes habituales. De requerirse infiltración se realizó en el mismo tiempo.

Resultados: Las concentraciones menores de mediadores de oxidación ocurrieron en sujetos sanos de manera global contra todos los padecimientos (p<0.0001) seguido por la OA (0.002ug/ml) y la mayor concentración de MOLS fue en AR. La concentración mayor también se relacionó con mayor edad.

Conclusión: Las concentraciones elevadas de MOLS en padecimientos reumáticos, en contraste con concentraciones bajas en sanos y OA pueden estar directamente relacionadas con el daño observado.

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Thursday, 19 de January de 2006

2005 - XIV JORNADAS DE INVESTIGACIÓN EN SALUD DEL ESTADO DE PUEBA Resumen No. 229

Efecto de los antibioticos aminoglucosido en la funcion antioxidante renal

Efecto de los antibioticos aminoglucosido en la funcion antioxidante renal

Juan M. Gallardo
Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Nefrológicas, CMN "Siglo :xxr', IMSS, Correo-e: gallardo@salud.gob.mx

OBJETIVO: Estudiar el efecto de la gentamicina y la estreptomicina en la función antioxidativa renal.

PROCEDIMIENTOS: Veinticuatro ratas de la cepa Wistar fueron divididas en tres grupos, GI: Testigo, solución salina isotónica; Gil: sulfato de estreptomicina, 300 mg/kg/IP /día/4 días; GIII: Sulfato de gentamicina 40 mg/kg/IP/día/4 días. Se evaluó en plasma: creatinina sérica, ácido úrico, proteínas, glucosa, bilirrubina, por métodos espectrofotométricos; potasioy sodio con flamometría y en homogeneizado de riñón se midió: proteína, superóxido de dismutasa (SOD), malondialdehído (MDA) y óxido nítrico (NOx) por métodos espectrofotométricos.

RESULTADOS: Se encontró que existe una marcada diminución en la presencia de ácido úrico, glucosa, bilirrubina, e incremento en creatinina, y óxido nítrico en las ratas tratadas con gentarnicina en plasma, mientras que en el homogeneizado renal hay incremento en la peroxidaxión lipídica y óxido nítrico, pero sin cambios en la superóxido de dismutasa.

CONCLUSIONES: La estreptomicina es el aminoglucósido con menor efecto nefrotóxico (comparable a los resultados encontrados en humanos) en tanto que la gentamicina es mas nefrotóxica, los resultados de este estudio demuestran que la gentarnicina afecta claramente la función antioxidativa renal.

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Wednesday, 18 de January de 2006

Juan M. Gallardo

Medico Cirujano, Universidad Autonoma de Aguascalientes
Diplomado en Investigación Clinica y epidemiologica, Facultad de Estudios Superioeres, Zaragoza, UNAM
Mestro en Ciencias (Fisiologia), Centro de Investigacion y Estudios Avanzados del IPN.

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Wednesday, 18 de January de 2006